Injeção intrafolicular em ovelhas - estudos prévios para o desenvolvimento da transferência intrafolicular de ovócitos imaturos (TIFOI)

A transferência intrafolicular de ovócitos imaturos (TIFOI) consiste na aspiração de folículos em fêmeas doadoras, para obtenção de ovócitos não maturados com posterior transferência para folículos pré-ovulatórios (FPO) de fêmeas receptoras, previamente sincronizada no dia do estro. O presente trabalho tem como objetivo a determinação do volume injetável e sua relação com o diâmetro do folículo, bem como o calibre ideal da agulha na prática de injeção intrafolicular. Os ovários utilizados para o experimento foram coletados de ovelhas abatidas no Município de Viçosa – Região da Zona da Mata – Estado de Alagoas, enviados ao Laboratório de Reprodução Animal (LARA) da Universidade Federal de Alagoas, onde foram realizadas mensurações, seguidas da introdução de solução de azul de metileno (0.1% em NaCl) nos folículos existentes. Os ovários foram observados diariamente no intuito de verificar  a distribuição do corante nos folículos, uma vez que o extravasamento é indicativo de perda de integridade da parede folicular. Do total dos 29 folículos inoculados, 12 não apresentaram extravasamento do corante, indicando que não houve comprometimento da integridade da parede folicular. Destes, utilizouse a agulha 25G em sete ovários enquanto a agulha 22G foi utilizada nos demais. Em todos os casos em que lesões significativas na membrana folicular foram ausentes, o volume de corante utilizado foi de 10 µl, o que pode evidenciar um parâmetro a ser utilizado futuramente. A respeito da técnica empregada, constatou-se erro na execução em quatro dos casos devido ao excesso de pressão exercida no momento da inoculação. O presente estudo demonstrou um bom direcionamento acerca do volume (10 µl) e o calibre da agulha (22 ou 25G) a serem utilizados na TIFOI em ovinos, contudo conclui-se a necessidade de mais estudos para posteriores práticas in vivo.

Intrafollicular transfer of immature oocytes (IFIOT) represents the harvesting of immature oocytes from donor females, through follicular aspiration, followed by oocyte transfer to prevulatory follicles (POF) of a recipient of low zootechnical value previously subjected to estrous synchronization. The present study aimed to determine the injectable volume and its relationship with follicle diameter, as well as the ideal needle size on this practice. Ovaries were collected from ewes slaughtered in Viçosa city – Zona da Mata of Alagoas state and sent to laboratory, where follicle size was determined with aid of a pachymeter and subsequent injection of methylene blue stain  (0.1% in NaCl). Therefore, the ovaries were daily inspected to verify if the stain remained within follicle, considering that stain extravasation is an indicative of loss of follicle wall integrity. From the total of inoculated follicles (n = 29) 12 presented no stain extravasation, indicating follicle wall integrity, have being used 25 G needle in seven ovaries and 22G needles in five In all cases were there was no loss of follicle wall integrity, 10 µl of solution were injected, indicating that this parameter could be adopted in future in vivo practices. It was noticed execution errors in four ovaries, due to excessive pressure during injection. It was concluded that more studies are needed seeking for ideal needle size and injected volume in further in vivo practices. However, the present study has presented a good guide regarding IFIOT in sheep.