Desenvolvimento de metodologia analítica para determinação colorimétrica de amoxilina em leite bovino in-natura
Desenvolvimento de metodologia analítica para determinação colorimétrica de amoxilina em leite bovino in-natura
<jose.wellington@arapiraca.ufal.br>
Ao longo da história do Brasil, o setor
leiteiro teve grande relevância econômica. Atualmente, o Brasil ocupa posição
de destaque no cenário internacional da produção leiteira. O monitoramento de
resíduos de antibióticos em leite é fundamental para garantir a segurança
alimentar e atender às exigências dos órgãos reguladores. Nesse contexto,
torna-se necessário o desenvolvimento de métodos analíticos cada vez mais
acessíveis, rápidos e eficientes para a detecção de resíduos de antibióticos no
leite. Entre as alternativas emergentes, os dispositivos microfluídicos em
papel (μPADs, do inglês Microfluidic Paper-Based Analytical Devices) que
possibilitam análises rápidas realizadas fora do ambiente laboratorial
convencional. Com isso, este trabalho teve como objetivo avaliar uma
metodologia colorimétrica baseada na reação de acoplamento azo entre a
amoxicilina e a sulfanilamida diazotizada como etapa preliminar para o
desenvolvimento de μPADs destinados à determinação de amoxicilina em leite
bovino. Inicialmente, foi realizada a extração da amoxicilina em amostras de
leite utilizando acetonitrila para precipitação de proteínas e obtenção de um
sobrenadante adequado para análise. Em seguida, foi investigada a reação
colorimétrica entre a amoxicilina e a sulfanilamida diazotizada em meio
alcalino. A validação da etapa de extração foi realizada por espectrofotometria
UV-Vis, utilizando curva analítica na faixa de 5 a 35 µg mL⁻ ¹, que apresentou faixa linear superior
a 0,99. As concentrações determinadas para as amostras extraídas resultaram em
recuperação média de aproximadamente 77%, indicando eficiência satisfatória da
extração para estudos preliminares. A reação entre a amoxicilina e a
sulfanilamida diazotizada promoveu o desenvolvimento de coloração amarela,
evidenciando a formação de um produto azo e demonstrando o potencial da
estratégia para aplicações colorimétricas. Os resultados obtidos indicam que
tanto o procedimento de extração quanto a reação proposta apresentam potencial para
utilização em futuras etapas de desenvolvimento de μPADs voltados à detecção de
amoxicilina em leite bovino.
Throughout Brazil's history, the dairy
sector has played a significant economic role. Currently, Brazil holds a
prominent position in the global dairy production industry. Monitoring
antibiotic residues in milk is essential to ensure food safety and comply with
the requirements of regulatory agencies. In this context, there is a need to
develop analytical methods that are increasingly accessible, rapid, and
efficient for detecting antibiotic residues in milk. Among the emerging
alternatives are Microfluidic PaperBased Analytical Devices (μPADs), which
enable rapid analyses to be performed outside conventional laboratory
environments. Therefore, this study aimed to evaluate a colorimetric
methodology based on the azo coupling reaction between amoxicillin and
diazotized sulfanilamide as a preliminary step toward the development of μPADs
for the determination of amoxicillin in bovine milk. Initially, amoxicillin was
extracted from milk samples using acetonitrile for protein precipitation,
yielding a suitable supernatant for analysis. Subsequently, the colorimetric
reaction between amoxicillin and diazotized sulfanilamide in an alkaline medium
was investigated. The extraction step was validated by UV–Vis spectrophotometry
using an analytical calibration curve in the concentration range of 5–35 µg mL⁻ ¹, which exhibited a linearity greater
than 0.99. The concentrations determined for the extracted samples resulted in
an average recovery of approximately 77%, indicating satisfactory extraction
efficiency for preliminary studies. The reaction between amoxicillin and
diazotized sulfanilamide produced a yellow coloration, confirming the formation
of an azo compound and demonstrating the potential of this strategy for
colorimetric applications. The obtained results indicate that both the
extraction procedure and the proposed reaction have potential for use in future
stages of μPAD development aimed at the detection of amoxicillin in bovine
milk.
Dr.ª Silva, Thaissa Lúcio.
Análise colorimétrica.
Antibióticos - Resíduos.
Amoxilina (Medicamento).